اقرأ هذه المقالة
محلول لاكتوفينول القطن الأزرق (LPCB): وهو محلول مائي وعامل تلطيخ بسيط للأنسجة، يستخدم للفحص المجهري وتحديد الفطريات. يساعد هذا المحلول على تلطيخ وتحديد الخلية الفطرية وبنيتها في العينة. ويمكن استخدامه أيضًا للكشف عن أنواع معينة من الطفيليات.
خواص محلول اللاكتوفينول القطني الأزرق
يتميز محلول القطن الأزرق لاكتوفينول بالعديد من الخصائص وهي:
- محلول اللاكتوفينول الأزرق القطني هو محلول تثبيت وعامل تلوين وصباغة.
- يعطي محلول اللاكتوفينول القطني الأزرق العينة مظهرًا أزرقًا وتكون الكائنات الحية الدقيقة والهياكل الفطرية تشبه الخيوط.
- يمثل محلول اللاكتوفينول القطني الأزرق جدران خلايا الفطريات.
- يستخدم محلول اللاكتوفينول القطني الأزرق في علم الفطريات الطبية لفحص بنية الخلايا الفطرية، وذلك عن طريق تحضير طبق مبلل يتكون من مكونين رئيسيين مثل أزرق الميثيل واللاكتوفينول.
- قد يتوفر محلول اللاكتوفينول القطني الأزرق في شكل مسحوق محضر تجاريًا أو يتم تحضيره في المختبر.
- يمكن استخدام هذا الحل لتحديد الفطريات البالغة وبنيتها، ولكن ليس الأشكال الصغيرة من الفطريات.
- لا يمكن تخزين الحل المحضر لفترة طويلة.
مكونات محلول اللاكتوفينول القطني الأزرق
محلول لاكتوفينول القطني الأزرق لونه أزرق ويتكون من خليط من المكونات التالية:
إقرأ أيضا:تعرف علي …. تشخيص طنين الأذن عند الأطفال 2025- الفينول: يعمل كمطهر عن طريق قتل الكائنات الحية الدقيقة مثل الفطريات.
- حمض اللاكتيك: يعمل حمض اللبنيك كعامل توضيح ويساعد في الحفاظ على الهياكل الفطرية.
- القطن الأزرق: وهي صبغة الأنيلين ذات اللون الأزرق التي تصبغ مادة الكيتين الموجودة في جدران خلايا الفطريات، مما يضيف لونًا إلى الخلية الفطرية وبالتالي يعززها ويتباينها مع الهياكل الفطرية الأخرى.
- الجلسرين: وهي مادة لزجة تمنع الشريحة المحضرة من الجفاف.
مبدأ عمل محلول اللاكتوفينول القطني الأزرق
يعتمد مبدأ عمل محلول اللاكتوفينول القطني الأزرق على:
- الفطريات هي كائنات حقيقية النواة، ذات سمات عيانية ومجهرية، ويتكون جدار خلاياها البوغية من الكيتين، ومكوناته ملطخة بمحلول اللاكتوفينول القطني الأزرق.
- يقتل الفينول الخلية الفطرية، وحامض اللبنيك يحمي بنيتها من التدمير، والجلسرين يثبط النشاط الخلوي للفطر، والقطن الأزرق يحول مادة الكيتين الموجودة في جدران الخلايا الفطرية إلى اللون الأزرق الفاتح.
كيفية تحضير محلول اللاكتوفينول القطني الأزرق؟
يمكن تحضير محلول اللاكتوفينول القطني الأزرق على النحو التالي:
- يضاف 20 مل من حمض اللاكتيك إلى الدورق.
- يضاف 40 مل من الجلسرين.
- أضف 20 مل من الماء المقطر.
- أضف 22 جرامًا من بلورات الفينول أو 22 مل من الفينول المذاب.
- يضاف 0.05 جرام من القطن الأزرق أو أزرق الميثيلين.
- يتم تسخين المحلول وتحريكه جيداً حتى تذوب المكونات، ولا يجوز غليه فوق درجة حرارة 100 درجة مئوية.
- يُترك المحلول ليبرد، ويمكن تخزينه في درجة حرارة الغرفة ويتم تحضيره قبل الاستخدام بيومين على الأقل.
خطوات التلوين بمحلول اللاكتوفينول والقطن الأزرق
هناك طريقتان لصبغ العينة بهذا المحلول:
إقرأ أيضا:تعرف علي حاسبة التمويل الشخصي بنك الجزيرة وخدمات التمويل الشخصي ببنك الجزيرة 20251. الطريقة الأساسية
تتطلب الطريقة الأساسية للصبغ بمحلول اللاكتوفينول القطني الأزرق تحضير عينة مجهرية خالية من الزيوت أو الدهون، وتكون على النحو التالي:
- يتم وضع قطرة من اللاكتوفينول الأزرق على شريحة نظيفة خالية من الزيت.
- تتم إضافة العينة الفطرية فوق هذه القطرة من اللاكتوفينول الأزرق باستخدام إبر تلقيح معقمة أو سلك تلقيح فولاذي من وسط المغذيات الفطرية، وليس من الحلقة المستخدمة للبكتيريا أو الخميرة.
- باستخدام اثنتين من هذه الأدوات، يتم توزيع عينة العفن بلطف بحيث يتم توزيعها بشكل رقيق في اللاكتوفينول.
- يتم وضع حافة نظيفة (غطاء منزلق) فوق خليط اللاكتوفينول وعينة العفن ثم يتم خفضها ببطء لمنع فقاعات الهواء من الدخول تحت الغطاء.
- بعد الانتهاء من كل شيء، يتم فحص الشريحة تحت المجهر.
2. طريقة الشريط
تتضمن طريقة الشريط تحضير شريط السيلوفان أو الشريط الشفاف للفحص المجهري للفطريات. إنها طريقة سهلة ورخيصة وسريعة التنفيذ وهي كما يلي:
- يتم قطع شريط من الشريط اللاصق الشفاف وتوضع الأطراف بحيث يكون الجانب اللاصق للخارج بين إصبعي الإبهام والسبابة.
- قم بإنشاء حلقة تمتد إلى الخارج عن طريق إغلاق إصبعي الإبهام والسبابة، ثم استخدم اليد الأخرى لفتح طبق الاستنبات واضغط على الشريط داخل عينة الاستزراع.
- يتم وضع قطرة من محلول اللاكتوفينول القطني الأزرق على شريحة زجاجية نظيفة.
- اضغط على المحلول بالشريط اللاصق بسلاسة عن طريق فتح الأصابع واستخدام الشاش.
- يتم وضع قطرة أخرى من المحلول أعلى الشريط.
- يتم وضع غطاء كبير ونظيف فوق الشريحة.
- بعد الانتهاء من كل شيء، يتم فحص الشريحة تحت المجهر.
نتيجة تلطيخ بمحلول اللاكتوفينول والقطن الأزرق
نتيجة الصبغ بمحلول اللاكتوفينول-القطن الأزرق هي كما يلي:
إقرأ أيضا:تعرف علي رقم امازون السعودية واتس اب 2025- يؤدي هذا المحلول إلى تحويل الجراثيم الفطرية والخيوط وهياكل الفاكهة إلى اللون الأزرق، بينما تكون الخلفية شاحبة أو زرقاء فاتحة.
مصدر:
“كتاب”مقدمة في علم الأحياء الدقيقة”المؤلف”إي جي في إيفانز“كتاب” لاكتوفينول قطن بلو ماونت “المؤلف” إس في لافانياكتاب “علم الطفيليات العملي” للكاتب “حسين فاضل حسن”“كتاب” دليل مختبر الفطريات البيطرية “المؤلف” أرنولد ر. سميث